Objetivo
Que el alumno aprenda a identificar y cuantificar correctamente a los reticulocitos.
Introducción
Los reticulocitos son eritrocitos jóvenes y contienen en su interior RNA-ribosomal el cual puede observarse en forma de red (de ahí su nombre) mediante un colorante supravital.
Cuando en la médula ósea aumenta la eritropoyesis, aumenta también el nñumero de reticulocitos que salen hacia la circulación.
Material, reactivos y equipo
- Sangre venosa con EDTA
- Colorante de azul de cresil brillante o nuevo azul de metileno
- Tubos de ensaye
- Portaobjetos
- Pipetas pasteur allo corto con bulbo
- Baño maria
- Microscopio
- Aceite de inmersión
Procedimiento
1.- Mezclar la muestra sanguínea y en un tubo de ensaye colocar 5 gotas con una pipeta pasteur.
2.- Agregarle 5 gotas del colorante con una pipeta pasteur y mezclar.
3.- Incubar el tubo de ensaye a 37 C durante 15 minutos en el baño maria.
4.- Mezclar la suspensión y realizar un frotis en portaobjetos.
5.- Dejarlo secar a temperatura ambiente, agregarle una gota de aceite de inmersión y observar con el objetivo 100X.
6.- Buscar células que presenten una red con coloración azul (reticulocitos). Contar 1000 eritrocitos en diferentes partes del frotis e ir registrando el número de reticulocitos observados.
Resultados
Número de reticulocitos observados x 100
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Número total de eritrocitos
Valor de referencia
Adultos: 0.5 - 2.0 %
Recién nacidos: 2.5 - 6.5 %
Muestra 1: 1.3%
