Prueba de Rumpel Leede

También llamada Prueba del lazo o torniquete, consiste en mantener elevada la presión en un miembro por un periodo de 5 minutos, con un lazo o el manguito inflable del Tensiómetro como para medir la T.A. y comprimirlo con una presión menor que la sistólica pero mayor que la diastólica para producir estasis sanguínea en las vénulas y capilares.

Material a estudiar:

Observación de la piel luego de interrumpir la circulación venosa. Se realiza el recuento de las petequias (pequeñas manchas hemorrágicas en un círculo de 5 cm de diámetro) normalmente no se debe producir más de 5 petequias por debajo de la compresión, especialmente en la cara palmar del antebrazo próxima al manguito neumático. Más de diez petequias, y sobre todo extendidas más allá del cuarto superior del antebrazo es patológico.

Tiempo insumido al paciente:

5 a 10 minutos.

Finalidad:

Determinar la fragilidad de las paredes capilares, estimar la tendencia a la hemorragia. Ayuda a reconocer la trombocitopenia.

Preparación previa:

No es necesaria. No repetir en el mismo miembro antes de los 7 días.

Resultados:

Valores normales:

Ninguna petequia o hasta diez petequias en un área de 5 cm. Escala para informar el número de petequias:

0 a 10 = 1+

10 a 20 = 2+

20 a 50 = 3+

50 o más petequias = 4+

Valores aumentados:

Pueden indicar coagulación intravascular difusa, disminución del fibrinógeno, disminución de la protrombina, deficiencia del factor VII, trombocitopenia, tromboastenia, enfermedad de Von Willebrand, deficiencia de vitamina K. Y puede estar asociado a afecciones no relacionadas con los trastornos de la coagulación como: escarlatina, hipertensión, diabetes, gripe, sarampión, escorbuto.

También es anormal la prueba en las trombopatías quizá debido a que por falla plaquetaria no hay vasoconstrucción adecuada ni formación de trombo blaco.

Confiabilidad:

Buena.

Medicamentos que pueden alterar los resultados:

Corticoesterides.

Resultados

 

Paciente 1: 1+



VDRL

Antígeno de cardiolipina para investigar reaginas de la sífilis en Suero sin inactivar, en Plasma y L. C. R. (no requiere reconstitución)

Agente de Diagnóstico

Introducción

Treponema pallidum, la bacteria que causa la sífilis, una enfermedad que generalmente se transmite por vía sexual.

Su diagnóstico puede ser serológico, con lo que se pueden determinar dos clases de anticuerpos:

1.    Tipo “cardiolipina”.- No treponema e inespecíficos

2.    Antitreponemas específicos

La prueba realizada Venereal Disease Research Laboratory VDRL se le conoce como una prueba para sífilis no-treponémica. Es parte de la exploración inicial de la sífilis e iniciar un tratamiento. Con  el método cualitativo empleando la  placa presenta floculación, si se presenta el caso se lleva a cabo el método cuantitativo con el o los sueros positivos.

También se emplea en el cuidado prenatal del embarazo, así como parte de los estudios de laboratorio prenatales.

Material

 

-  Placa cóncava

-  Puntillas

-  Aguja No. 21 sin bisel

-  Cronómetro

Equipo

- Pipeta semiautomática

-  Microscopio

Muestra

-  Suero

(Obtener 3 ml. de sangre por punción venosa, centrifugar y separar el suero)

Reactivo

-  Antígeno VDRL y los Sueros de Controles (almacenados 2-8°C)

 

Procedimiento

       Método cualitativo

1. Depositar 0.05 ml. de suero problema en un anillo de la placa cóncava.

2. En otro anillo colocar una gota de suero control positivo y en el anillo siguiente una gota
de suero control negativo, extendiendo dentro de los mismos.
3. Añadir una gota del antígeno en suspensión previamente resuspendido en cada muestra
con la aguja N.21
4. Colocar la placa sobre un agitador mecánico a 180 rpm durante 4 min.
 (Nota: lo realizamos de forma manual a falta de agitador).
Las pruebas que se realizan en un clima extremadamente seco pueden evaporarse, por lo tanto
la paca se cubre con la tapa de una caja Petri humedecida.

Interpretación de resultados

Control positivo: Presencia de floculación mediana o grande.

Control negativo: Ausencia de floculación.

Resultados

Paciente 1: Negativo

 

Rosa de bengala

 Antígeno Brucelar Amortiguado para el Diagnóstico de Brucelosis

Introducción

Es una  prueba, basada en la aglutinación como respuesta a la presencia de alguna de las aglutininas de Brucella (abortus, mellitensis y suis). Bacterias causantes de la Brucelosis, organismos virulentos e infecciosos para el hombre que adquiere generalmente por vía mucocutánea, por consumir carne contaminada con la bacteria, abrasiones o cortes en la piel, inhalación de aerosol o contaminación de la conjuntiva; invadiendo el sistema linfático y puede alcanzar a diversos órganos.

Por ello se realiza la prueba de Rosa de Bengala por ser una prueba sensible y rápida que permite una aproximación diagnóstica inmediata.se empela sobre todo en las zonas no endémicas, como método de "despistaje". Emplea como antígeno una suspensión bacteriana a la que se ha añadido el colorante rosa de bengala, enfrentándola al suero sin diluir del enfermo.

 

Material

 

-  Placa cóncava

-  Puntillas

-  Cronómetro

Equipo

- Pipeta semiautomática

      - Microscopio

Muestra

-  Suero

(Obtener 3 ml. de sangre por punción venosa, centrifugar y separar el suero)

Reactivo

 

- Antígeno Rosa de Bengala

- Control Positivo de Brucella

- Control Negativo de Brucella

 

Procedimiento

1. Llevar a temperatura ambiente el reactivo, controles y muestras de suero.

2. Utilizando la pipeta automática adicione 30 μL de la muestra del paciente en un círculo de la placa.

3. Mezcle suavemente el Antígeno Rosa de Bengala hasta que se encuentre totalmente homogéneo, después  coloque 30 μL en la placa de prueba, en el mismo círculo donde se colocó la muestra del paciente, mezcle ambas con un aplicador. (Usar un aplicador diferente para cada muestra). Repita este paso para cada muestra de paciente y controles.

4. Agitar la placa con movimientos rotatorios por 4 minutos.

5. Con la ayuda de una fuente de luz directa lea el resultado.

 Nota: Después de este tiempo(4 min.) la lectura ya no es válida

 

La lectura debe llevarse a cabo exactamente a los 4 minutos tomados a partir de que se comenzó a mezclar

Es el tiempo límite óptimo para la observación de ciertas aglutininas que se revelan lentamente puesto que se pueden presentar reacciones no específicas.

Interpretación

Control positivo: Presencia de aglutinación indica la existencia de anticuerpos específicos.

Control negativo: Ausencia de aglutinación.

Resultados

Paciente 1: Negativo

Retracción del coágulo

OBJETIVO

Al término de la práctica el alumno será capaz de realzar e interpretar la prueba de R.C.

INTRODUCCIÓN

Puesto que el coágulo de fibrina encierra los elementos organizados (celulares) de la sangre (in vitro e in vivo) el volumen de los glóbulos rojos establece el límite inferior de la retracción de la fibrina. Por lo tanto, siendo normales los demás factores, el coágulo se retrae tanto mas cuando menor es el hematocrito. La retracción es directamente proporcional al número de plaquetas, e inversamente al hematocrito. Cuando las fibrinolinas son muy activas la fibrina puede disolverse casi tan rápidamente como se forma, y la retracción del coágulo se modifica en los trastornos de este tipo: choque, quemaduras, etc.

Mide la cantidad de fibrina formada y su retracción; así como el número de función de las plaquetas, pues poseen proteína similar a la actomiosina, que produce la retracción del coágulo.

Material

- Tubos de ensaye para centrífuga

- Alambre de 1mm de grosor

- Baño María de 37° C

- Equipo de venopunción

Técnica

 

 

1. Se pone en un tubo de centrífuga graduado de 5ml de sangre venosa recién obtenida. Se lleva el alambre al fondo del tubo.
    
    
   
    
2. Se pone el tubo en el alambre, de un baño de agua a 37° C en donde se deja 1 hora. Después de la formación del coágulo sin tocarlo.
   
3. Se saca el alambre cuidadosamente y se deja escurrir dentro del tubo el coágulo unido al alambre durante 1 a 2 minutos.
   
4. Se lee el volumen del líquido que quedó en el tubo. El resultado se expresa como un porcentaje del volumen inicial de 5ml.

Ejemplo: Si después de la coagulación 5 ml de sangre suministraron 3 ml de líquido:

                                               La retracción es de: 3 X 100 / 5  = 60 %

 

Valores normales

Entre 48 y 64 %

 

Resultados

2.5 X 100 / 5 = 50%

                                  

Grupo sanguíneo y Rh

Determinación de aglutinógenos (tipado globular)

 

Principio: En la membrana del glóbulo rojo existen complejos químicos llamados antígenos que representan los llamados grupos o factores sanguíneos.

 

Se sabe que estos complejos químicos se han generado de una sustancia precursora, llamada sustancia H (humana). Sobre esta sustancia se adhieren carbohidratos en un orden determinado. Para la sangre de tipo cero "O"  se unen dos moléculas de galactosa, una de mucosa, una de glucosa y una de glucosamina.

 

Sobre esta cadena puede adherirse una nueva molécula y se cambia el tipo, si es de glucosamina se tiene el grupo "A" y si es de galactosa se tiene el grupo "B". Si se unen ambas moléculas en diversa posición se tiene el grupo "AB".

 

Los primeros grupos sanguíneos que se descubrieron fueron los llamados "ABO" y actualmente se conocen muchos más.

 

El sistema Rh es independiente del sistema ABO, pero igual de importante en la tipificación sanguínea.

 

Hay antígenos presentes en los eritrocitos de casi todas las personas y se les llama Universales, otros antígenos se han concentrado en una sola familia y se les llama Familiares y se han concentrado algunos otros que pertenecen solamente a un individuo y se les llama Personales.

 

La importancia de la determinación de los grupos sanguíneos y Rh en el laboratorio es en las transfusiones sanguíneas y en la eritroblastosis fetal.

 

Factor Rh

 

Introducción: Los grupos sanguíneos se han clasificado así por poseer características diferentes, éstas características son los antígenos (Aglutinógenos) y los anticuerpos (Aglutininas) que son los responsables de las reacciones adversas inmunológicas en las transfusiones .

 

 

Material y reactivos

• 1 Placa de vidrio excavada
• 10 Aplicadores de madera
• Lanceta estéril
• Suero Anti A
• Suero Anti B
• Suero Anti D

 

Procedimiento

 

1. Se utiliza la punción cutánea por medio de la lanceta.
   

   
2. Se desecha la primera gota.
3. Se deposita una gota en cada una de las excavaciones de la placa.
   

   
4. Se añade una gota de suero Anti A, Anti B y Anti D respectivamente.
   

   
5. Mezclar perfectamente con el aplicador cada preparación (no contaminar las diferentes preparaciones).
6. Agitar suavemente la placa con movimientos circulares durante 30 segundos aproximadamente.
   

   
7. Leer el resultado (una aglutinación macroscópica indicará la reacción).
   

    

 

Interpretación

 

Anti A               Anti B               Anti D               El grupo sanguíneo y su Factor será:

 

   +                        -                           +                         A Rh positivo

 

   +                        -                           -                          A Rh negativo

 

   -                         +                          +                         B Rh positivo

 

   -                         +                          -                          B Rh negativo

 

  +                         +                          +                         AB Rh positivo

 

  +                         +                          -                          AB Rh negativo

 

  -                          -                           +                         O Rh positivo

 

  -                          -                           -                           O Rh negativo     

 

 

 

Resultados

 

Paciente 1: A Rh positivo

 

Paciente 2: A Rh positivo

 

 

 

 





Recuento diferencial de leucocitos

Introducción

El recuento diferencial de leucocitos consiste en reconocer y valorar las proporciones relativas de las distintas variedades de glóbulos blancos que se observan en un frotis teñido de sangre.
Al conocer la proporción de las células sanguíneas que están presentes en el torrente sanguíneo cualquier trastorno patológico que altere el sistema hematopoyético podría verse reflejado en un cambio de la proporción de una especie celular. Para el recuento diferencial se tiene que observar un mínimo de 100 leucocitos.
Hay varios métodos de recuento diferencial de leucocitos pero el mas utilizado es el de almena y en línea.

Material y reactivos

 

• Frotis sanguíneo teñido
• Microscopio
• Aceite de inmersión
• Un contador de células

 

Procedimiento

 







1. Se coloca el frotis en el microscopio y se enfoca.
    
   
    
    
    
    
    
   
2. Se le agrega una gota de aceite de inmersión y se observa con el objetivo de 100X.
3. Si el recuento se hace en línea se empieza en un borde del frotis hasta el otro borde en línea paralela hasta contar 100 leucocitos.
4. Se van contando los mononucleares (monocitos y linfocitos) y los polimorfonucleares (neutrófilos, eosinófilos, y basófilos) según su morfología.
5. Se reportan en % (valor relativo) o en valor absoluto (mm3).

Valor de referencia

 

                                            ADULTOS                                  NIÑOS

LINFOCITOS                      20 - 55%                                      20 - 50%

 

MONOCITOS                      2 - 6%                                          0 - 9%

 

EOSINÓFILOS                    1 - 5 %                                         0 - 8%

 

BASÓFILOS                        0 - 1%                                          0 - 1 %

 

NEUTRÓFILOS                  45 - 70%                                      20 - 60%

 

BANDAS                             0 - 5%                                           1 - 6%

 

 

RESULTADOS

 

• Linfocitos = 34%
• Monocitos = 4%
• Eosinófilos = 2%
• Basófilos = 1%
• Neutrófilos = 53%
• Bandas = 6%



Conteo de leucocitos

INTRODUCCIÓN:

El conteo de los elementos formes de la sangre es indispensable para la hematología diagnostica. Para contar leucocitos se diluye una cantidad exacta de sangre con el líquido de Turk, que es una solución hipotónica que destruye a los eritrocitos y conserva la estructura de los leucocitos, esta mezcla se coloca en una cámara de Neubauer y se cuenta el número de células en los cuadros indicados.

MATERIAL Y REACTIVOS

1.    Pipeta de thoma para glóbulos blancos.

2.    Una cámara de Neubauer.

3.    Un microscopio.

4.    Solución de Turk.

5.    Gasas.

6.    Sangre venosa con EDTA.

PROCEDIMIENTO

1.    Obtener sangre venosa con EDTA y mezclar perfectamente. 

2.    Aspirar sangre con la pipeta de thoma hasta la marca. 

3.    Limpiar la parte externa de la pipeta con gasa o papel absorbente.

4.    Aspirar líquido de Turk hasta la marca.

5.    Retirar la boquilla de la pipeta y sellar los extremos con papel parafilm.

6.    Agitar la pipeta de thoma de 3 a 5 min, y preparar la cámara de Neubauer con el cubrehematimetro.

7.    Descartar las 3 primeras gotas y llenar la cámara por capilaridad por uno de los bordes del cubrehematimetro, sin que se deformen burbujas o sobrepasen los canales de la cámara.

8.    Dejar reposar de 3 a5 min, la cámara con la muestra dentro de una caja Petri con un paño húmedo.

9.    Enfocar la cámara en el microscopio y contar los leucocitos con el objetivo seco débil en 64 cuadros de las 4 cuadriculas de los extremos. 

10- Multiplicar el número de leucocitos contados por 50.

VALOR DE REFERENCIA:

5,000 A 10,000/mm3

RESULTADOS

1-    WBC =  5853/mm3 

2-    WBC =  7150/mm3