sábado, 18 de octubre de 2014

Retracción del coágulo


OBJETIVO

Al término de la práctica el alumno será capaz de realzar e interpretar la prueba de R.C.

INTRODUCCIÓN

Puesto que el coágulo de fibrina encierra los elementos organizados (celulares) de la sangre (in vitro e in vivo) el volumen de los glóbulos rojos establece el límite inferior de la retracción de la fibrina. Por lo tanto, siendo normales los demás factores, el coágulo se retrae tanto mas cuando menor es el hematocrito. La retracción es directamente proporcional al número de plaquetas, e inversamente al hematocrito. Cuando las fibrinolinas son muy activas la fibrina puede disolverse casi tan rápidamente como se forma, y la retracción del coágulo se modifica en los trastornos de este tipo: choque, quemaduras, etc.

Mide la cantidad de fibrina formada y su retracción; así como el número de función de las plaquetas, pues poseen proteína similar a la actomiosina, que produce la retracción del coágulo.

Material

- Tubos de ensaye para centrífuga

- Alambre de 1mm de grosor

- Baño María de 37° C

- Equipo de venopunción

Técnica

 
 
  1. Se pone en un tubo de centrífuga graduado de 5ml de sangre venosa recién obtenida. Se lleva el alambre al fondo del tubo.
     
     
     
  2. Se pone el tubo en el alambre, de un baño de agua a 37° C en donde se deja 1 hora. Después de la formación del coágulo sin tocarlo.
  3. Se saca el alambre cuidadosamente y se deja escurrir dentro del tubo el coágulo unido al alambre durante 1 a 2 minutos.
  4. Se lee el volumen del líquido que quedó en el tubo. El resultado se expresa como un porcentaje del volumen inicial de 5ml.

Ejemplo: Si después de la coagulación 5 ml de sangre suministraron 3 ml de líquido:

                                               La retracción es de: 3 X 100 / 5  = 60 %

 

Valores normales

Entre 48 y 64 %

 

Resultados

2.5 X 100 / 5 = 50%

                                  

sábado, 6 de septiembre de 2014

Grupo sanguíneo y Rh

Determinación de aglutinógenos (tipado globular)
 
Principio: En la membrana del glóbulo rojo existen complejos químicos llamados antígenos que representan los llamados grupos o factores sanguíneos.
 
Se sabe que estos complejos químicos se han generado de una sustancia precursora, llamada sustancia H (humana). Sobre esta sustancia se adhieren carbohidratos en un orden determinado. Para la sangre de tipo cero "O"  se unen dos moléculas de galactosa, una de mucosa, una de glucosa y una de glucosamina.
 
Sobre esta cadena puede adherirse una nueva molécula y se cambia el tipo, si es de glucosamina se tiene el grupo "A" y si es de galactosa se tiene el grupo "B". Si se unen ambas moléculas en diversa posición se tiene el grupo "AB".
 
Los primeros grupos sanguíneos que se descubrieron fueron los llamados "ABO" y actualmente se conocen muchos más.
 
El sistema Rh es independiente del sistema ABO, pero igual de importante en la tipificación sanguínea.
 
Hay antígenos presentes en los eritrocitos de casi todas las personas y se les llama Universales, otros antígenos se han concentrado en una sola familia y se les llama Familiares y se han concentrado algunos otros que pertenecen solamente a un individuo y se les llama Personales.
 
La importancia de la determinación de los grupos sanguíneos y Rh en el laboratorio es en las transfusiones sanguíneas y en la eritroblastosis fetal.
 
Factor Rh
 
Introducción: Los grupos sanguíneos se han clasificado así por poseer características diferentes, éstas características son los antígenos (Aglutinógenos) y los anticuerpos (Aglutininas) que son los responsables de las reacciones adversas inmunológicas en las transfusiones .
 
 
Material y reactivos
  • 1 Placa de vidrio excavada
  • 10 Aplicadores de madera
  • Lanceta estéril
  • Suero Anti A
  • Suero Anti B
  • Suero Anti D
 
Procedimiento
 
  1. Se utiliza la punción cutánea por medio de la lanceta.
  2. Se desecha la primera gota.
  3. Se deposita una gota en cada una de las excavaciones de la placa.
  4. Se añade una gota de suero Anti A, Anti B y Anti D respectivamente.
  5. Mezclar perfectamente con el aplicador cada preparación (no contaminar las diferentes preparaciones).
  6. Agitar suavemente la placa con movimientos circulares durante 30 segundos aproximadamente.
  7. Leer el resultado (una aglutinación macroscópica indicará la reacción).
     
 
Interpretación
 
Anti A               Anti B               Anti D               El grupo sanguíneo y su Factor será:
 
   +                        -                           +                         A Rh positivo
 
   +                        -                           -                          A Rh negativo
 
   -                         +                          +                         B Rh positivo
 
   -                         +                          -                          B Rh negativo
 
  +                         +                          +                         AB Rh positivo
 
  +                         +                          -                          AB Rh negativo
 
  -                          -                           +                         O Rh positivo
 
  -                          -                           -                           O Rh negativo     
 
 
 
Resultados
 
Paciente 1: A Rh positivo
 
Paciente 2: A Rh positivo
 
 
 
 



viernes, 5 de septiembre de 2014

Recuento diferencial de leucocitos

Introducción

El recuento diferencial de leucocitos consiste en reconocer y valorar las proporciones relativas de las distintas variedades de glóbulos blancos que se observan en un frotis teñido de sangre.
Al conocer la proporción de las células sanguíneas que están presentes en el torrente sanguíneo cualquier trastorno patológico que altere el sistema hematopoyético podría verse reflejado en un cambio de la proporción de una especie celular. Para el recuento diferencial se tiene que observar un mínimo de 100 leucocitos.
Hay varios métodos de recuento diferencial de leucocitos pero el mas utilizado es el de almena y en línea.

Material y reactivos
 
  • Frotis sanguíneo teñido
  • Microscopio
  • Aceite de inmersión
  • Un contador de células
 
Procedimiento
 




  1. Se coloca el frotis en el microscopio y se enfoca.
     
     
     
     
     
     
  2. Se le agrega una gota de aceite de inmersión y se observa con el objetivo de 100X.
  3. Si el recuento se hace en línea se empieza en un borde del frotis hasta el otro borde en línea paralela hasta contar 100 leucocitos.
  4. Se van contando los mononucleares (monocitos y linfocitos) y los polimorfonucleares (neutrófilos, eosinófilos, y basófilos) según su morfología.
  5. Se reportan en % (valor relativo) o en valor absoluto (mm3).

Valor de referencia
 
                                            ADULTOS                                  NIÑOS
LINFOCITOS                      20 - 55%                                      20 - 50%
 
MONOCITOS                      2 - 6%                                          0 - 9%
 
EOSINÓFILOS                    1 - 5 %                                         0 - 8%
 
BASÓFILOS                        0 - 1%                                          0 - 1 %
 
NEUTRÓFILOS                  45 - 70%                                      20 - 60%
 
BANDAS                             0 - 5%                                           1 - 6%
 
 
RESULTADOS
 
  • Linfocitos = 34%
  • Monocitos = 4%
  • Eosinófilos = 2%
  • Basófilos = 1%
  • Neutrófilos = 53%
  • Bandas = 6%


sábado, 30 de agosto de 2014

Conteo de leucocitos

INTRODUCCIÓN:
El conteo de los elementos formes de la sangre es indispensable para la hematología diagnostica. Para contar leucocitos se diluye una cantidad exacta de sangre con el líquido de Turk, que es una solución hipotónica que destruye a los eritrocitos y conserva la estructura de los leucocitos, esta mezcla se coloca en una cámara de Neubauer y se cuenta el número de células en los cuadros indicados.

MATERIAL Y REACTIVOS
1.    Pipeta de thoma para glóbulos blancos.
2.    Una cámara de Neubauer.
3.    Un microscopio.
4.    Solución de Turk.
5.    Gasas.
6.    Sangre venosa con EDTA.

PROCEDIMIENTO
1.    Obtener sangre venosa con EDTA y mezclar perfectamente. 


2.    Aspirar sangre con la pipeta de thoma hasta la marca. 
3.    Limpiar la parte externa de la pipeta con gasa o papel absorbente.
4.    Aspirar líquido de Turk hasta la marca.
5.    Retirar la boquilla de la pipeta y sellar los extremos con papel parafilm.
6.    Agitar la pipeta de thoma de 3 a 5 min, y preparar la cámara de Neubauer con el cubrehematimetro.
7.    Descartar las 3 primeras gotas y llenar la cámara por capilaridad por uno de los bordes del cubrehematimetro, sin que se deformen burbujas o sobrepasen los canales de la cámara.
8.    Dejar reposar de 3 a5 min, la cámara con la muestra dentro de una caja Petri con un paño húmedo.
9.    Enfocar la cámara en el microscopio y contar los leucocitos con el objetivo seco débil en 64 cuadros de las 4 cuadriculas de los extremos. 

10- Multiplicar el número de leucocitos contados por 50.

VALOR DE REFERENCIA:
5,000 A 10,000/mm3

RESULTADOS
1-    WBC =  5853/mm3 

2-    WBC =  7150/mm3

viernes, 9 de mayo de 2014

Reticulocitos

Objetivo

Que el alumno aprenda a identificar y cuantificar correctamente a los reticulocitos.

Introducción

Los reticulocitos son eritrocitos jóvenes y contienen en su interior RNA-ribosomal el cual puede observarse en forma de red (de ahí su nombre) mediante un colorante supravital.
Cuando en la médula ósea aumenta la eritropoyesis, aumenta también el nñumero de reticulocitos que salen hacia la circulación.

Material, reactivos y equipo

  • Sangre venosa con EDTA
  • Colorante de azul de cresil brillante o nuevo azul de metileno
  • Tubos de ensaye
  • Portaobjetos
  • Pipetas pasteur allo corto con bulbo
  • Baño maria
  • Microscopio
  • Aceite de inmersión
Procedimiento
1.- Mezclar la muestra sanguínea y en un tubo de ensaye colocar 5 gotas con una pipeta pasteur.
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    2.- Agregarle 5 gotas del colorante con una pipeta pasteur y mezclar.
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    3.- Incubar el tubo de ensaye a 37 C durante 15 minutos en el baño maria.

    4.- Mezclar la suspensión y realizar un frotis en portaobjetos.
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    5.- Dejarlo secar a temperatura ambiente, agregarle una gota de aceite de inmersión y observar con el  objetivo 100X.
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    6.- Buscar células que presenten una red con coloración azul (reticulocitos). Contar 1000 eritrocitos en diferentes partes del frotis e ir registrando el número de reticulocitos observados.

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Resultados

Número de reticulocitos observados x 100
___________________________________
Número total de eritrocitos

Valor de referencia

Adultos: 0.5 - 2.0 %
Recién nacidos: 2.5 - 6.5 %

Muestra 1: 1.3%


lunes, 14 de abril de 2014

ÍNDICES ERITROCITARIOS (VALORES ABSOLUTOS)

(Valor Hto %)(10)                        
_______________  = V.C.C en M3
No. de eritrocitos / l    VALORES NORMALES
                                      82-92 M3

Sustitución

(46%)(10)        460
_________ = ______ = 88.8 M3 (valor normal)
5,180,000       5.18 / l

  

(Hb en gr/dl)(10)
_____________ = H.C.M. en pg
No. eritrocitos/l      VALORES NORMALES
                                 28-32 pg
Sustitución

(15.28)(10)
_________ = 29.49 pg (valor normal)
5.18 / l


  

  

(Hb en gr/dl)(10)
_____________ = C.H.C.M. en %
Valor Hto %           VALORES NORMALES
                                32-36%
Sustitución

(15.28)(10)
_________ = 33.21 % (valor normal)
     46%

jueves, 3 de abril de 2014

Hematocrito

INTRODUCCIÓN
El hematocrito es el volúmen que ocupan los eritrocitos en una muestra sanguínea y se expresa en porcentaje.
La determinación de hematocrito es un método sencillo y confiable para detectar anemia o policitemia.
El hematocrito se puede determinar por 2 métodos:
1.- MACROMÉTODO (WINTROBE)
2.- MICROMÉTODO

MATERIAL Y REACTIVOS
  • Tubo de Wintrobe                                    - Sangre venosa
  • Tubo capilar
  • Plastilina
  • Centrifuga
  • Microcentrifuga
  • Pipeta Pasteur tallo largo
  • Equipo para venopunción
  • Lector para hematocrito o regla
TÉCNICA (MACROMÉTODO)
  1. Mezclar la muestra sanguínea suavemente y con una pipeta pasteur o canula llenar el tubo de wintrobe, colocando la punta de la pipeta hasta el fondo del tubo, la punta de la pipeta se va elevando pero permaneciendo por debajo del menisco de sangre para evitar la formación de burbujas o espuma.                                                                                 
  2. El tubo se llena hasta la marca 100 con la muestra sanguínea y se pone a centrifugar durante 30 minutos a 3000 rpm.                                                               
  3. Se efectúa la lectura.
TÉCNICA (MICROMÉTODO)
1.- Mezclar la muestra sanguínea adecuadamente y llenar un tubo capilar hasta 3/4 partes. 
2.- El extremo vacío que no estuvo en contacto con la sangre se sella con plastilina o calor. 
3.- El tubo con la muestra sanguínea se coloca en la microcentrifuga a 10,000 rpm. durante 10 minutos.
4.- Leer el porcentaje de hematocrito en el lector o medirlo con una regla. 

VALORES NORMALES
Hombres: 42% - 52%
Mueres: 37% - 47%
RESULTADOS
Muestra 1: 
Macrométodo: 65%
Micrométodo: 47%

Muestra 2:
Macrométodo: 44%
Micrométodo: 43%